干粉培養基在使用之前必須進行滅菌處理

　　其中，濕熱滅菌法又包括四種方式：煮沸法、流動蒸汽滅菌法、間歇滅菌法和壓力蒸汽滅菌法。通常來說，使用比較多的是壓力蒸汽滅菌法。

　　但是對于有些培養基來說，高壓條件會損壞培養基中的某些成分，不利于培養基的使用，所以只能采用煮沸滅菌的處理方法。

　　接下來主要就煮沸滅菌方法進行討論，話不多說一起看看吧。

　　一、煮沸滅菌的常見表述

　　有關煮沸滅菌的描述，通常有如下幾種方式：

　　a、稱取本品41.5g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，煮沸不要超過2分鐘。無需高壓滅菌。臨用時制備，不得超過3小時。(參考VRBA培養基：點擊查看)

　　b、稱取本品50.3g，加入1000ml蒸餾水中，加熱煮沸至*溶解，冷至45-50℃，搖勻，傾入無菌平皿備用。無需高壓滅菌。(參考BS培養基：點擊查看)

　　c、稱取本品89g，煮沸溶解于1000ml蒸餾水中，冷至45-50℃時，傾入無菌平皿，備用。注：無需高壓滅菌。(參考TCBS培養基：點擊查看)

　　d、稱取本品57g，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，不要過分加熱，冷至50-55℃時，傾入無菌平皿,部分開蓋干燥2h，然后蓋上，備用。無需高壓滅菌。在 24小時內使用。(參考XLD培養基：點擊查看)

　　這些方法描述中，都特別強調“無需高壓滅菌”、“不要過分加熱”、“煮沸充分溶解”，那么究竟該怎樣操作，才能達到既滅菌*又盡量降低對培養基的破壞呢?

　　二、煮沸滅菌的實際操作

　　1、關于煮沸方式，有人提出可以隔水煮沸，但經過反復試驗，發現這種煮沸方式存在兩大弊端：①溫度不夠，達不到滅菌效果;②經隔水煮沸的含瓊脂培養基，在水浴的過程中易出現分層現象。

　　2、為了對培養基進行有效煮沸滅菌，根據我們實踐摸索，建議如下操作：

　?、贉蕚浜秒姶艩t和搪瓷缸(不要用鐵質容器);

　?、趯⑴囵B基按比例加水，稱量至搪瓷缸中，用玻璃棒不斷攪拌，直至*溶解、無明顯團狀物或顆粒;

　　③將搪瓷缸置于電磁爐上，大火燒開，期間持續攪拌，避免糊底;當液面*沸騰后，立即將搪瓷缸從電磁爐上拿開，算是一次煮沸操作;液面回落后，立即放回電磁爐，重復上面的步驟;總共煮沸3次即可。

　　④將煮好的培養基冷卻至需要的溫度，進行傾注平皿等操作。